Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ): сайт технической поддержки

Добрый день. Подскажите пожалуйста, с чем может быть связана проблема неровной линии детектора при градиентном элюировании? на середине градиента появляется провал, а на высоком проценте подвижной фазы В появляются посторонние пики, с определенным периодом и схожие по форме. Колонка (С18) хорошо уравновешена подвижной фазой А, система промыта, подвижные фазы (5, 95% ацетонитрил с 0,1% ТФУ) свежеприготовлены. Неровная базовая линия мешает проведению теста. Замена колонки проблему не решает.

Если раньше проблем не наблюдалось. Скорее всего проблема в узле ввода пробы (инжектор/автосамплер).
Что делите, полимеры?

Разделяем белки, их примеси и гидролизаты белков. Исключая инжектор из жидкостного пути, проблема остается

Таисия, Вы, видимо, работаете с уф детектированием, а оно слабо совместимо с ТФУ и любыми органическими добавками. Это условия для MS или ELSD детектирования, где добавки должны быть летучими. А на УФ-е они должны быть прозрачными. Замените ТФУ на фосфорную к-ту.

Да в том-то и дело, что особо условия хроматографирования менять не могу, воспроизводим европейскую фармакопею.

Ну чтобы понять в чем проблема - сделать то все-таки надо, не так ли?

Добрый день, попробовала заменить кислоту на фосфорную, но проблема не решилась, на высоком проценте ацетонитрила линия детектора искривляется, появляются "симметричные призрачные пики" и порой не только при 100% В, но и ранее, что мешает проведению анализа.

Я думаю у Вас дело в чистоте ацетонитрила, и еще какие то проблемы с насосом.
Там видно два скачка на Вашей хроматограмме как раз связанные с провалом давления.
Видимо что-то с входным клапаном.