Как спасти колонку для ЖХ?

[Zubo4istka]

В первые же дни работы с хроматографом поставили Пласдон С-15 (Повидон) субстанцию на колонку HPLC EC 250/4 NUCLEOSIL 100-5 C18 и предколонкой HPLC EC 4/3 NUCLEOSIL 100-5 C18. После ввода испытуемого раствора, колонку с предколонкой промыли в обратном положении на протяжении 20 минут подвижной фазой (вода-метанол 80:20)при потоке 1,0 мл/мин, так повторяли 5 раз (5 проб,5 раз промыли) все прошло благополучно. На след. день на эту же колонку поставили Метронидазол раствор для инъекций, подвижна фаза метанол-калий дигидрофосфат, все тоже было нормально. Через 2 дня простоя, давление насоса стало превышать норму, он выдавал ошибку (давление могу стабилизировать только при уменьшении потока с 1,0 на 0,2). Поменяла предколонку, толку "0", промывала весь день колонку в обратном положении смесью метанол-вода 50:50, толку "0". Только подключаю предколонку к колонке давление зашкаливает. В сливной емкости после промывки колонки на поверхности образуется налет, забила я колонку?( Как ее спасти?

[Клим]

От различных буферов отмывайте колонку водой подольше, при регенерации в обратном положении ставьте скорость не более 0,1-0,2 мл/мин, иначе можно нарушить плотность упаковки сорбента. Если предполагается длительное хранение, то лучше заполнить ацетонитрилом или изопропанолом и в холодильник в горизонтальном положении чтоб не испарялся.

[maz]

.... Если предполагается длительное хранение, то лучше заполнить ацетонитрилом или изопропанолом и в холодильник в горизонтальном положении чтоб не испарялся.

Клим, добрый день! А можно поподробнее о хранении колонок, если не трудно?

[Клим]

Здравствуйте! Возможно этот материал Вам поможет...

http://www.studsell.com/view/126685/70000

[maz]

Спасибо, очень познавательно!

[Константин Сычев]

Добрый день! Возможно, дело не в колонке? если капилляр пииковский, то можно сильно его затянуть и пережать..
Посмотрите капилляр на конце - тот, что в колонку идет. Он сильно деформирован?
Чтобы забить колонку за пару минут, надо вколоть реально какую-то плотную взвесь. если вклалываете что-то прозрачное, то ничего колонке не будет, это все фантазии. налет в элюате? так элюент-то с солью!

[Константин Сычев]

Десятиминутный ответ на вопрос http://www.youtube.com/watch?v=Y-vU1Mya ... e=youtu.be